Metode Pemeriksaan Glukosa Darah

Metode untuk Pemeriksaan Glukosa Darah

1.    Somogyi – Nelson

Prinsip : protein diendapkan dengan Ba(OH)₂ dan ZnSO₄ disertai zat pereduksi lainnya. Filtrat dipanaskan suhu 100°C selama 20 menit dengan larutan tembaga tartrat basa, terjadi oksidasi glukosa :

Glukosa   + Cu²⁺     +  OH^-    ----->  mix sugar acid  + Cu₂O

Cu₂O  + arsenomolibdat (Mo⁶⁺) + 4H⁺ ----> 2 Cu²⁺ + arsenomolibdat (Mo⁵⁺) biru + H₂O

2.    Folin – Wu

Prinsip : protein diendapkan dengan Ba(OH)₂ dan ZnSO₄ disertai zat pereduksi lainnya. Filtrat dipanaskan suhu 100°C selama 20 menit dengan larutan tembaga tartrat basa, terjadi oksidasi glukosa :

Glukosa   + Cu²⁺     +  OH^-    ----->  mix sugar acid  + Cu₂O

Cu₂O direaksikan dengan larutan fosfomolibdat terbentuk kompleks molibdenum berwarna biru dan diukur spektrofotometer pada 420 nm.

3.    Hagedorn – Jansen

Prinsip : Ferricyanida berwarna kuning dalam suasana basa dan panas akan direduksi oleh glukosa menjadi ferrocyanida yang tak berwarna. Kelebihan ferricyanida ditentukan secara iodometri menggunakan KI dalam asam membentuk iodium, dititrasi dengan tiosulfat dengan indikator amylum.

2 Fe(CN)₆^3-    + 2 I^-   ----->   2 Fe(CN)₆^4-  + I₂

I₂  + S₂O₃^2-    ----> 2 I^-     +  S₄O₆^2-

4.    Kingley – Reinhold

Prinsip : Ferricyanida berwarna kuning dalam suasana basa dan panas akan direduksi oleh glukosa menjadi ferrocyanida yang tak berwarna. Memucatnya warna larutan diukur pada 420 nm dan sebanding dengan kadar glukosa. Cara ini diganggu oleh creatinine dan asam urat karena bereaksi juga, dengan kadar yang tinggi sangat berpengaruh.

5.    Orto Toluidine

Prinsip : Glukosa bereaksi melalui gugus aldehide berkondensasi dengan orto-toluidin menghasilkan kesetimbangan glukosamine dan basa schiff. Warna yang terjadi dukur pada spektrofotometer.

6.    GOD PAP

Prinsip : Cara enzimatik menggunakan glukosa oksidase dan peroksidase. Glukosa dioksidasi oleh enzim glukosa oksidase (GOD) membentuk asam glukonat dan H₂O₂. H₂O₂ yang terbentuk dengan fenol dan 4-aminophenazone dan bantuan enzim peroksidase membentuk kompleks berwarna merah yang diukur pada spektrofotometer panjang gelombang 546 nm.

7.    Heksokinase

Prinsip : Glukosa dihidrolisis dengan bantuan glukosa oksidase (GOD), terjadi perubahan NAD+ menjadi NADH, kecepatan perubahan NAD+ menjadi NADH diukur pada panjang gelombang 340 nm

8.    Glukostick

Prinsip : Metode stick penetapan kadar glukosa berdasarkan teknik deteksi elektrokimia. Darah diteteskan pada carik uji, enzim glukosa oksidase akan mengkatalisis glukosa oksidase menghasilkan asam glukonat. Selama reaksi terjadi pelepasan elektron dipindahkan ke elektrokimiawi ferricinium⁺ ke permukaan elektroda, arus listrik yang diukur oleh sensor. Besarnya arus sebanding dengan kadar glukosa